LC-MS/MS 數(shù)據(jù)偏差？4 步快速排查指南

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)出現(xiàn)偏差是LC-MS/MS分析中的常見困擾，但不必驚慌！通過系統(tǒng)性的排查，可快速定位問題根源。以下是4步高效排查流程：

1. 樣品與制備：從源頭把關(guān)

* 樣品狀態(tài)： 檢查樣品是否降解、沉淀或渾濁，必要時重新制備。

* 前處理過程： 確認(rèn)移液體積是否準(zhǔn)確、渦旋/離心是否充分、萃取效率是否穩(wěn)定。特別注意：內(nèi)標(biāo)峰面積是否穩(wěn)定？ 顯著波動提示樣品制備或進(jìn)樣問題。

* 基質(zhì)效應(yīng)： 對比純?nèi)軇┡c基質(zhì)加標(biāo)樣品的響應(yīng)差異，評估離子抑制/增強(qiáng)效應(yīng)。

2. 液相系統(tǒng)：保障分離穩(wěn)定性

* 色譜峰形： 觀察峰是否拖尾、展寬或出現(xiàn)肩峰。峰形異常常與以下相關(guān)：

* 色譜柱狀態(tài)： 柱效是否下降？進(jìn)行柱效測試（如理論塔板數(shù)）。立即排查：系統(tǒng)壓力是否異常升高？ 提示可能柱頭堵塞或填料塌陷。

* 流動相： 是否新鮮配制？pH值是否正確？緩沖鹽是否析出？有機(jī)相比例是否準(zhǔn)確？

* 進(jìn)樣器： 針座密封墊是否漏液？進(jìn)樣針是否掛滴？清洗程序是否有效？

* 保留時間漂移： 檢查柱溫箱溫度是否穩(wěn)定，流動相比例是否準(zhǔn)確輸送。漂移超過0.1分鐘需警惕。

3. 質(zhì)譜系統(tǒng)：確保離子化與檢測

* 離子源： 首要清潔離子源！ 噴嘴、錐孔、透鏡等處的污染是靈敏度下降和響應(yīng)不穩(wěn)的常見元兇。

* 調(diào)諧與校準(zhǔn)： 運(yùn)行調(diào)諧液檢查質(zhì)量精度、分辨率和靈敏度。關(guān)鍵指標(biāo)：目標(biāo)化合物母離子/子離子強(qiáng)度是否顯著下降？ 下降明顯提示離子化效率問題。

* 氣體與電壓： 確認(rèn)霧化氣、干燥氣、碰撞氣(CAD)壓力/流量正常，毛細(xì)管電壓、碰撞能量等參數(shù)設(shè)置無誤。

* 污染排查： 檢查MS入口毛細(xì)管、預(yù)四極桿是否污染。

4. 數(shù)據(jù)處理與方法：細(xì)節(jié)決定成敗

* 積分參數(shù)： 檢查峰識別和積分是否準(zhǔn)確，尤其基線分離不佳或存在共流出物時。手動復(fù)核關(guān)鍵峰積分！

* 方法參數(shù)： 確認(rèn)采集窗口、駐留時間、碰撞能量等設(shè)置正確，特別是多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)方法。

* 系統(tǒng)適用性： 運(yùn)行QC樣品或標(biāo)準(zhǔn)品，評估精密度、準(zhǔn)確度是否在控。

* 軟件與版本： 確認(rèn)無軟件故障或版本兼容性問題。

總結(jié)： 面對LC-MS/MS數(shù)據(jù)偏差，保持冷靜，遵循“樣品→液相→質(zhì)譜→數(shù)據(jù)”的鏈條式排查。重點(diǎn)關(guān)注內(nèi)標(biāo)穩(wěn)定性、壓力變化、離子源清潔度及關(guān)鍵離子響應(yīng)強(qiáng)度。多數(shù)問題通過清潔離子源、更換預(yù)柱/保護(hù)柱、重新配制流動相/標(biāo)準(zhǔn)品即可解決。養(yǎng)成定期維護(hù)與QC監(jiān)控的習(xí)慣，可極大減少偏差發(fā)生。祝您實(shí)驗(yàn)順利，數(shù)據(jù)精準(zhǔn)！