在LC-MS/MS分析中，數(shù)據(jù)的精準度直接影響結(jié)果的可靠性。關(guān)注以下操作細節(jié)，能顯著提升數(shù)據(jù)質(zhì)量：

1.樣品制備與溶劑匹配：避免“溶劑效應(yīng)”。樣品溶液的溶劑強度（尤其是有機相比例）必須低于或等于流動相的起始比例。強溶劑注入弱流動相會導(dǎo)致目標物在柱頭過早洗脫、峰形展寬甚至分裂。對于揮干復(fù)溶的樣品，務(wù)必使用流動相起始比例復(fù)溶。

2.色譜柱平衡與系統(tǒng)穩(wěn)定性：更換流動相或色譜柱后，充分平衡至關(guān)重要。建議用起始比例流動相以分析方法流速沖洗至少10-15倍柱體積。開啟質(zhì)譜前，確保基線和壓力穩(wěn)定。梯度分析后，用高比例起始流動相充分沖洗并重新平衡，消除殘留影響。

3.質(zhì)譜參數(shù)優(yōu)化與定期調(diào)諧/校準：

*關(guān)鍵參數(shù)校準：定期使用標準品（如廠家提供的調(diào)諧液）進行質(zhì)量軸校準（MassCalibration）和分辨率調(diào)諧（ResolutionTuning），確保質(zhì)量準確性和峰寬（分辨率）符合要求。

*源參數(shù)優(yōu)化：針對特定化合物和流動相，優(yōu)化離子源參數(shù)（如霧化氣溫度/流速、干燥氣流速、毛細管電壓）。毛細管電壓的微小變化（如±0.5V）可能顯著影響離子化效率。定期清洗離子源和采樣錐孔，防止污染導(dǎo)致信號衰減或重現(xiàn)性變差。

4.進樣體積與洗針程序：

*控制進樣體積：避免過載。根據(jù)方法靈敏度、線性范圍和色譜柱容量（尤其小粒徑柱）合理選擇進樣體積。過大體積可能導(dǎo)致峰展寬、拖尾或柱超載。

*優(yōu)化洗針程序：設(shè)置有效的洗針液（通常包含一定比例強溶劑和弱溶劑）和洗針次數(shù)（內(nèi)洗針、外洗針），徹底清除進樣針內(nèi)/外壁殘留的前一樣品組分，防止交叉污染（Carryover）。對于粘稠或強吸附樣品，需增加洗針強度（如溶劑比例、次數(shù)、時間）。

5.合理設(shè)置質(zhì)譜采集方法：

*駐留時間（DwellTime）：在保證靈敏度的前提下，為每個MRM（多反應(yīng)監(jiān)測）通道分配足夠的駐留時間（通常建議≥10-20ms）。過短的駐留時間會導(dǎo)致數(shù)據(jù)點不足，峰形呈鋸齒狀，影響積分精度和定量準確性。通道過多時需權(quán)衡駐留時間與循環(huán)時間。

*延遲采集（DelayTime）：在梯度開始時，設(shè)置合適的延遲時間（如1-2分鐘）再開始質(zhì)譜采集，避免高比例強溶劑和基質(zhì)早期洗脫組分對離子源的沖擊和污染。

總結(jié)：LC-MS/MS的精準度是系統(tǒng)各環(huán)節(jié)協(xié)同作用的結(jié)果。從樣品制備的溶劑匹配、色譜系統(tǒng)的穩(wěn)定平衡、質(zhì)譜參數(shù)的精確優(yōu)化與維護，到進樣的嚴謹控制和數(shù)據(jù)采集的合理設(shè)置，每一個細節(jié)都至關(guān)重要。養(yǎng)成規(guī)范操作習(xí)慣并定期進行系統(tǒng)性能驗證，是獲得可靠、精準分析數(shù)據(jù)的根本保障。