在臨床診斷中，液質(zhì)聯(lián)用（LC-MS/MS）檢測(cè)尿樣時(shí)，確定稀釋倍數(shù)是一項(xiàng)關(guān)鍵步驟，目的是確保目標(biāo)分析物的濃度落在儀器的最佳檢測(cè)范圍內(nèi)（即線性范圍內(nèi)），從而獲得準(zhǔn)確、可靠的結(jié)果。廣州中森檢測(cè)等專業(yè)機(jī)構(gòu)會(huì)根據(jù)具體檢測(cè)項(xiàng)目和待測(cè)物的特性，綜合以下因素科學(xué)確定稀釋倍數(shù)：

1. 目標(biāo)分析物的預(yù)期生理/病理濃度范圍：

* 這是最重要的依據(jù)。不同物質(zhì)在尿液中的濃度差異巨大。例如：

* 內(nèi)源性物質(zhì)（如激素、代謝物）： 濃度范圍相對(duì)穩(wěn)定（但個(gè)體間仍有差異），實(shí)驗(yàn)室會(huì)基于大量人群數(shù)據(jù)建立參考區(qū)間。

* 外源性物質(zhì)（如治療藥物、濫用藥物、毒素）： 濃度范圍非常寬泛，取決于劑量、攝入時(shí)間、個(gè)體代謝差異等。治療藥物監(jiān)測(cè)（TDM）通常有目標(biāo)治療濃度范圍，而濫用藥物或毒素濃度可能極高。

* 實(shí)驗(yàn)室需要了解待測(cè)物在目標(biāo)人群（如健康人、特定疾病患者、用藥患者）中可能出現(xiàn)的最高和最低濃度。

2. 分析方法的動(dòng)態(tài)范圍和線性范圍：

* 動(dòng)態(tài)范圍： 儀器能檢測(cè)到的最低濃度（定量限，LOQ）到最高濃度（通常指響應(yīng)仍與濃度成比例的上限）之間的范圍。

* 線性范圍： 在動(dòng)態(tài)范圍內(nèi)，儀器響應(yīng)信號(hào)與樣品濃度嚴(yán)格呈線性關(guān)系的范圍。這是進(jìn)行準(zhǔn)確定量分析的最佳區(qū)間。

* 實(shí)驗(yàn)室在方法開(kāi)發(fā)驗(yàn)證時(shí)，會(huì)精確測(cè)定該方法的線性范圍（例如：0.5 ng/mL - 500 ng/mL）。目標(biāo)分析物的濃度必須落在這個(gè)線性范圍內(nèi)才能保證結(jié)果準(zhǔn)確。

3. 基質(zhì)效應(yīng)：

* 尿液成分復(fù)雜（鹽分、尿素、代謝物等），可能干擾目標(biāo)物的離子化效率（離子抑制或增強(qiáng)效應(yīng)）。稀釋是降低基質(zhì)效應(yīng)的常用手段。但過(guò)度稀釋可能使低濃度樣品低于LOQ。因此，稀釋倍數(shù)的選擇需在確保濃度在線性范圍內(nèi)和有效控制基質(zhì)效應(yīng)之間取得平衡。

4. 儀器靈敏度（LOQ）：

* 如果目標(biāo)物的預(yù)期最低濃度接近或低于方法的LOQ，則不能過(guò)度稀釋，否則會(huì)導(dǎo)致假陰性或結(jié)果不準(zhǔn)確。

廣州中森檢測(cè)的濃度范圍適配策略：

廣州中森檢測(cè)等專業(yè)實(shí)驗(yàn)室會(huì)采取以下策略來(lái)適配濃度范圍并確定稀釋倍數(shù)：

1. 基于文獻(xiàn)和經(jīng)驗(yàn)設(shè)定初始稀釋倍數(shù)： 根據(jù)目標(biāo)分析物的已知特性、常見(jiàn)濃度范圍以及已驗(yàn)證方法的線性范圍，設(shè)定一個(gè)初始的、較常用的稀釋倍數(shù)（如1:10, 1:20, 1:50, 1:100等）。這適用于濃度范圍相對(duì)穩(wěn)定或可預(yù)測(cè)的項(xiàng)目。

2. 結(jié)果反饋與調(diào)整：

* 如果檢測(cè)結(jié)果（尤其是高濃度樣品）接近或超出線性范圍上限（表現(xiàn)為響應(yīng)值飽和或曲線平臺(tái)），則提示初始稀釋倍數(shù)不足，需要增加稀釋倍數(shù)重新檢測(cè)。

* 如果檢測(cè)結(jié)果接近LOQ或低于LOQ，則提示初始稀釋倍數(shù)過(guò)大，需要減小稀釋倍數(shù)或用原液直接進(jìn)樣重新檢測(cè)（如果基質(zhì)效應(yīng)允許）。

3. 預(yù)設(shè)稀釋方案： 對(duì)于某些濃度范圍特別寬泛的項(xiàng)目（如某些藥物濫用篩查），實(shí)驗(yàn)室可能預(yù)先設(shè)定不同梯度的稀釋方案（如原液、1:10、1:100）。如果低倍稀釋結(jié)果超出上限，則自動(dòng)采用高倍稀釋方案重新檢測(cè)。

4. 儀器自動(dòng)稀釋功能： 現(xiàn)代LC-MS/MS儀器常配備自動(dòng)稀釋功能（在線稀釋），能根據(jù)初步掃描信號(hào)判斷樣品濃度是否過(guò)高，并自動(dòng)進(jìn)行適當(dāng)稀釋后重新進(jìn)樣分析，提高效率。

5. 方法學(xué)驗(yàn)證與持續(xù)優(yōu)化： 實(shí)驗(yàn)室在建立和驗(yàn)證方法時(shí)，會(huì)系統(tǒng)評(píng)估不同稀釋倍數(shù)下的線性范圍、精密度、準(zhǔn)確度和基質(zhì)效應(yīng)，確定最優(yōu)的稀釋策略。并會(huì)根據(jù)實(shí)際運(yùn)行數(shù)據(jù)和客戶反饋持續(xù)優(yōu)化。

總結(jié)：

尿樣LC-MS/MS檢測(cè)的稀釋倍數(shù)，核心目標(biāo)是將目標(biāo)分析物的濃度調(diào)整至儀器分析方法的最佳線性范圍內(nèi)。廣州中森檢測(cè)等實(shí)驗(yàn)室通過(guò)結(jié)合目標(biāo)物的預(yù)期濃度范圍、方法的已驗(yàn)證線性范圍和靈敏度、基質(zhì)效應(yīng)影響以及實(shí)際檢測(cè)結(jié)果的反饋，科學(xué)、動(dòng)態(tài)地確定或調(diào)整稀釋倍數(shù)。對(duì)于濃度范圍差異大的項(xiàng)目，預(yù)設(shè)多級(jí)稀釋方案或利用儀器自動(dòng)稀釋功能是常見(jiàn)且高效的適配策略。最終目的是確保為臨床診斷提供準(zhǔn)確可靠的定量結(jié)果。